Was ist ein Mikroplattenleser?
Ein Mikroplattenlesegerät ist ein Gerät, das gleichzeitig die Absorption mehrerer in eine Mikroplatte injizierter Proben messen kann. Die Anzahl der Proben hängt von der Anzahl der Vertiefungen in der Mikroplatte ab, aber normalerweise können Dutzende oder mehr Proben gleichzeitig gemessen werden, was die Arbeitseffizienz erheblich verbessern kann. Sie werden für Forschungs- und Quantifizierungszwecke in der Chemie und Biologie verwendet, am häufigsten für die Quantifizierung von Proteinen. Sie sollen zwar die Arbeitseffizienz verbessern, haben aber den Nachteil, dass aufgrund der winzigen Mengen, die gemessen werden, Fehler auftreten können.
Anwendungen von Mikroplattenlesern
Mikroplattenlesegeräte werden in der Chemie und Biologie zur Quantifizierung von Proteinen und zur Messung von Zellwachstumsraten eingesetzt. Weitere Anwendungen sind die Messung von Konzentrationen mittels Farbreaktion und Fluoreszenzpolarisation, die ohne radioaktive Substanzen sicher durchgeführt werden kann. Sie werden vor allem dann eingesetzt, wenn eine große Anzahl von Proben auf einmal bearbeitet werden muss, was zu einer verbesserten Arbeitseffizienz beiträgt und die Belastung des Forschers verringert. Darüber hinaus erfordern Absorptionsmessungen häufig eine Vorbehandlung und beinhalten häufig Reaktionen in Mikroplatten.
Funktionsweise der Mikroplattenleser
Mikroplattenlesegeräte können für Absorptions- und Fluoreszenzmessungen verwendet werden, die jeweils unterschiedliche Messprinzipien, Merkmale und Vorsichtsmaßnahmen aufweisen und daher in zwei Kategorien unterteilt werden.
- Absorptionsmessung
Die Funktionsweise der Absorptionsmessung, die häufig verwendet wird, ist einfach. Die Absorption wird bestimmt, indem die Probe in der Mikroplatte mit Licht einer beliebigen Wellenlänge bestrahlt wird und die Intensität des Lichts gemessen wird, das durch die Probe in die entgegengesetzte Richtung durchgelassen wird. Nach der Bestimmung der Absorption kann die Probe zur Kalibrierung verwendet und die Konzentration der Probe mit Hilfe des Lambert-Baer-Gesetzes bestimmt werden. Ist die Mikrotiterplatte jedoch zerkratzt oder verunreinigt, oder gelangen Luftblasen in die Probe, kann die korrekte Absorption nicht gemessen werden und ist möglicherweise größer als der ursprüngliche Wert. - Fluoreszenzmessung
Die Probe wird mit Hilfe eines Filters, der bestimmte Wellenlängen abschneidet, mit Licht bestrahlt, und die Lichtintensität in der reflektierten langwelligen Bandbreite wird gemessen. Dies beruht auf der Eigenschaft fluoreszierender Materialien, einen bestimmten Wellenlängenbereich zu absorbieren, in einen angeregten Zustand überzugehen und Energie freizusetzen, wenn sie in ihren Grundzustand zurückkehren. Diese Energie wird in Form von Wärme und Licht freigesetzt, was bedeutet, dass das Licht erfasst werden sollte. Da die Fluoreszenz der Probe selbst detektiert wird, ist dies ein Merkmal, das sehr genaue Messungen ermöglicht.