Was ist eine Zählkammer?
Eine Zählkammer ist ein Gerät, das zum Zählen von Zellen verwendet wird. Er wird auch als Hämozytometer bezeichnet. Er wird zu diesem Zweck verwendet, da die Zellen vor Aufgaben wie Zellfusionstechniken oder Zellkulturen gezählt werden müssen.
Die Größe der Zellen hängt von dem zu messenden Objekt ab, z. B. von Blutzellen wie roten und weißen Blutkörperchen, Lymphozyten oder anderen kultivierten Zellen. Aus diesem Grund ist auch der Skalenbereich der Zählkammer für verschiedene Objekte unterschiedlich.
Anwendungen von Zählkammern
Zählkammern werden in der Forschung und Entwicklung von zellbezogenen Technologien eingesetzt. Durch die Berechnung von Zellzahlen lassen sich verschiedene notwendige Werte wie Zelldichte und Überlebensraten berechnen. Er wird immer als Vorstufe zu Zellkulturverfahren wie Transfektion, Zellfusionstechnologie und Kryokonservierung verwendet.
Funktionsweise der Zählkammern
Die Zählkammer verfügt über eine Reihe von gleichmäßig verteilten Teilungen mit unterschiedlichen Schrittweiten, aus denen sich die Zahlenwerte errechnen lassen. Die Konzentration der Suspension wird so eingestellt, dass sich etwa 100 Zellen in einem Rahmen von 1 mm pro Seite befinden, und die Anzahl der lebenden Zellen in einem aus 16 Quadraten bestehenden Rahmen wird gezählt.
Anwendung der Zählkammer und des Deckglases
1. Zählkammer
Zunächst werden die zu beobachtenden Zellen entnommen und im Medium resuspendiert. Anschließend wird die Zellsuspension mit einem Farbstoff gefärbt, um lebende und tote Zellen zu unterscheiden. Da tote Zellen gefärbt sind, lebende Zellen jedoch nicht, wird das Vorhandensein oder Fehlen von Farbe zur Unterscheidung zwischen lebenden und toten Zellen verwendet.
Es ist wichtig, die Konzentration der Suspension auf ein angemessenes Niveau einzustellen, so dass sich etwa 100 Zellen im Rahmen befinden, da eine zu konzentrierte Suspension schwer zu messen ist und eine zu verdünnte Suspension nicht korrekt gemessen werden kann. Zunächst wird die Anzahl der lebenden Zellen innerhalb des größten 1 mm großen quadratischen Rahmens von 16 Quadraten gezählt, aber wenn die Anzahl der Zellen zu groß ist, wird der verwendete Maßstab entsprechend der Größe der Zellen verkleinert.
Durch die Messung der Anzahl der lebenden und toten Zellen durch diesen Vorgang kann die Lebensfähigkeit der Zellen berechnet werden.
2. Deckglas
Die Zählkammer wird mit einem Deckglas in engem Kontakt verwendet. Das Deckglas sollte vor dem Gebrauch mit Ethanol gewaschen und an der Luft getrocknet werden. Unmittelbar vor dem Gebrauch befeuchten Sie es leicht mit Wasser und legen es auf die Skalenfläche der Zählkammer. Achten Sie darauf, das Glas nicht zu zerbrechen, und üben Sie leichten Druck aus, als ob Sie es mit den Fingern aneinander reiben, damit es an der Zählkammern-Tafel haftet.
Prüfen Sie jetzt, ob Newton-Ringe vorhanden sind, um sicherzustellen, dass das Glas fest haftet. Newtonsche Ringe sind regenbogenfarbene Interferenzstreifen, die entstehen, wenn Glas mit einer Oberfläche mit gleicher prozentualer Krümmung übereinander gelegt wird. Sie sind nicht sichtbar, wenn Staub oder andere Verunreinigungen zwischen die Zählkammern und das Deckglas eingedrungen sind.
Wenn die Newton-Ringe nicht bestätigt werden können, wischen Sie die Skalenoberfläche der Zählkammern und das Deckglas mit einem Mulltuch oder einem ähnlichen Tuch ab, das eine angemessene Menge Ethanol enthält, und prüfen Sie erneut auf dieselbe Weise. Beachten Sie, dass sich die Tiefe der Rechenkammer bei Verschmutzung verändert und eine genaue Zählung nicht möglich ist.
Bei einigen Einwegprodukten ist kein Deckglas erforderlich. In solchen Fällen ist es möglich, die Herstellung von Newton-Ringen zu vermeiden.
Arten von Zählkammern
1. Zählkammern vom Typ Bürker-Türk
Es gibt mehrere Typen von Zählkammern mit unterschiedlichen Skalenbeschriftungen und Rechenkammertiefen. Der am häufigsten verwendete Typ ist der Bürker-Türk-Zählkammern-Typ.
Er ist ein Duplex-Rechner mit zwei Rechenkammern und kann eine Vielzahl von Zellen zählen, darunter rote und weiße Blutkörperchen, aber auch Spermien, Bakterien, Hefe, Plankton und kultivierte Zellen. Bei den Zählkammern vom Typ Bürker-Türk hat jede Zählkammer ein Volumen von 0,9 µL und die Skalenstriche sind so gestaltet, dass jede Seite der Skala sowohl in der Länge als auch in der Breite 3 mm beträgt.
Diese eine Seite ist wiederum in neun 1 mm x 1 mm große Blöcke unterteilt. Davon wird der mittlere Block hauptsächlich für die Zählung von Zellen mit einer hohen absoluten Zahl verwendet, wie z. B. rote Blutkörperchen, während die Blöcke in den vier Ecken für die Zählung von Zellen mit einer relativ niedrigen absoluten Zahl verwendet werden, wie z. B. weiße Blutkörperchen und kultivierte Zellen.
2. Andere Zählkammern für Blutzellen
Andere Typen von Zählkammern sind der Thoma-Typ, ein Einkammer- und Einstufenrechner, und der modifizierte Neubauer-Typ, ein Zweistufenrechner ähnlich dem Bürker-Türk-Typ, aber mit einfacheren Teilungsstrichen.