Was ist ein CO2-Inkubator?
Ein CO2-Inkubator ist ein Kulturgerät für die Kultivierung von Zellen unter physiologischen Bedingungen.
Die Kontrolle von Temperatur, Luftfeuchtigkeit und pH-Wert ist in der Zellkultur äußerst wichtig. Wenn diese Parameter nicht angemessen sind, wird nicht nur die Zellfunktion beeinträchtigt, sondern im schlimmsten Fall sterben die Zellen ab.
Der CO2-Inkubator ist ein Gerät, das diese Parameter genau kontrolliert, um eine normale Zellfunktion aufrechtzuerhalten und zellbasierte Experimente zu unterstützen. Insbesondere kann er Kohlendioxid (CO2) zuführen, um den pH-Wert des mit Karbonat gepufferten Mediums konstant zu halten.
Anwendungen von CO2-Inkubatoren
CO2-Inkubatoren werden verwendet, um Zellen unter Bedingungen zu kultivieren, die in Bezug auf Funktion und Gesundheit dem lebenden Organismus so nahe wie möglich kommen. Beim Screening von neuen Medikamenten beispielsweise werden die Wirkstoffkandidaten den kultivierten Zellen zugesetzt, um ihre Wirkung zu überprüfen. Um die Wirkungen eines Medikaments richtig beurteilen zu können, müssen sich die kultivierten Zellen unter nahezu physiologischen Bedingungen befinden.
Auch bei der Untersuchung von Zellfunktionen in der biologischen Grundlagenforschung oder bei der Durchführung von Gentransfer-Experimenten kann die Kultivierung und Pflege von Zellen unter geeigneten Bedingungen über Erfolg oder Misserfolg des Experiments entscheiden.
Funktionsweise des CO2-Inkubators
Der CO2-Inkubator hält das Gleichgewicht zwischen den Karbonat-Ionen im Medium und dem CO2-Gas in der Kammer aufrecht, indem die CO2-Konzentration in der Kammer auf bis zu 5 % eingestellt wird, so dass die Karbonat-Ionen im Medium auf einer konstanten Konzentration gehalten werden. Auf diese Weise kann der pH-Wert des Mediums bei 7,4 gehalten werden, was den physiologischen Bedingungen nahe kommt.
Die meisten Nährmedien für Zellkulturen sind leicht alkalisch, aber Karbonate wie Natriumbikarbonat (NaHCO3) werden zugesetzt, um den pH-Wert auf etwa 7,4 einzustellen. Unter normalen atmosphärischen Bedingungen liegt die CO2-Konzentration unter 0,05 %, so dass das Gleichgewicht der Carbonat-Ionen im Medium gestört ist und sie als Kohlendioxid (CO2) aus dem Medium in die Atmosphäre abgegeben werden, wodurch der pH-Wert des Mediums ansteigt (alkalisch wird).
Die Aufgabe des CO2-Inkubators besteht darin, die Parameter mit verschiedenen Sensoren zu überwachen und durch Rückkopplung sicherzustellen, dass die Parameter auf den eingestellten Werten gehalten werden. Die Inkubationstemperatur wird für Säugetierzellen auf 37 °C und die Luftfeuchtigkeit auf über 95 % gehalten. Eine Verringerung der Luftfeuchtigkeit fördert die Verdunstung von Wasser aus dem Medium, was zu einem Anstieg der Konzentration der Bestandteile des Mediums und zu Veränderungen des osmotischen Drucks führt.
Weitere Informationen zu CO2-Inkubatoren
1. Sauerstoffkonzentration in CO2-Inkubatoren
Die CO2-Konzentration wird häufig auf etwa 5 % eingestellt. Das liegt daran, dass CO2-Inkubatoren Geräte sind, die die CO2-Konzentration und nicht die Sauerstoffkonzentration steuern.
Einige Inkubatoren, z. B. Multigas-Inkubatoren, können jedoch die Sauerstoffkonzentration steuern. Es gibt auch so genannte Sauerstoffregler, die bei CO2-Inkubatoren nachgerüstet werden können. Durch die Steuerung der Sauerstoffkonzentration auf ein niedriges Niveau mit diesen Geräten ist es möglich, die Reaktion der kultivierten Zellen unter Bedingungen zu beobachten, die denen in vivo ähneln.
2. Reinigung des CO2-Inkubators
CO2-Inkubatoren bieten eine geeignete Umgebung für die Kultivierung von Zellen, doch gleichzeitig begünstigen Temperatur und Feuchtigkeit das Wachstum kontaminierender Bakterien. Die regelmäßige Reinigung des Inkubators ist wichtig, um das Wachstum kontaminierender Bakterien und eine Verunreinigung zu verhindern. Eine gute Faustregel für die Häufigkeit der Reinigung ist alle zwei Wochen bis einmal im Monat.
Reinigung des Innenraums des Inkubators
Wischen Sie die Innenflächen und Einlegeböden mit ausgewrungener Alkoholwatte ab. Reinigen Sie schnell, denn je länger die Tür geöffnet ist, desto geringer sind CO2-Konzentration, Temperatur und Luftfeuchtigkeit. Wenn die Einlegeböden herausgenommen werden können, reinigen Sie sie mit Spülmittel und Wasser, trocknen Sie sie und setzen Sie sie wieder ein.
Auch die Verwendung von Reinigungsmitteln für Brutkästen ist wirksam. Bei einigen Typen von Brutschränken kann die Oberfläche der Kammer durch Sprühreinigung gereinigt werden, während sich die Kulturen noch in der Kammer befinden.
Reinigung der Befeuchtungswannen
Das Wasser, das den Befeuchtungswannen zugeführt wird, um die Luftfeuchtigkeit aufrechtzuerhalten, ist in der Regel destilliertes Wasser mit geringen Verunreinigungen, in dem sich jedoch Schimmel und Bakterien bilden können. Besser ist es, dem Wasser ein Konservierungsmittel beizumischen. Zu den Konservierungsmitteln gehören Oxypen M in einer Konzentration von 0,2-0,3 %, S.D.S. in einer Konzentration von 0,5 %, Hibitene-Lösung in einer Konzentration von 0,02 % und EDTA in einer Konzentration von 0,1 %.
Die Befeuchtungsstäbe werden während des Wasserwechsels gereinigt. Reinigen Sie sie mit Spülmittel und Wasser, tragen Sie dann steriles Wasser auf und wischen Sie sie trocken. Wenn keine Verunreinigungen zu sehen sind, genügt ein Abwaschen mit Wasser ohne Reinigungsmittel.